關于如何鑒定收到的新細胞是否有污染

發布時間： 2019-12-05   

一、肉眼觀察以下幾項：
1. 細胞瓶身：
如果瓶身上沒有裂縫，正常；如果瓶身上有裂縫，則污染幾率非常大。
2. 培養基顏色：
如果培養基顏色是紅色或者粉色，正常；如果是橙色，則可能是污染或者細胞過密；如果是黃色，則污染幾率非常大。
3. 培養基澄清度：
如果培養基澄清，正常；如果有少許漂浮物，則可能是污染或者有細胞凋亡；如果培養基很渾濁，甚至出現絮狀物，則污染幾率非常大。

二、進行顯微鏡下觀察（通常觀察前需先靜置細胞1-2h）
顯微鏡下可以清晰觀察到細胞是否有菌類污染，菌類污染通常分為桿菌、球菌和霉菌，為了方便大家分辨，我特地找了之前收到有典型污染的細胞照片，希望能幫助大家判斷。
1. 桿菌

 

 

常見的有大腸桿菌，長度通常在2-5um左右。

2. 球菌

 

 

常見的有葡萄球菌，直徑通常在1-2um左右。

3. 霉菌

 

 

常見的有毛霉，菌絲寬2-10um左右，長度短則幾十um，長則可達幾mm。

       需要提醒的是，因為運輸過程中細胞離開了其正常生長所需要的環境，部分細胞會出現凋亡或產生細胞碎片，容易誤認為是細菌污染；另外培養基中的雜質纖維也容易誤認為是霉菌污染，具體區分方法如下：

1.細胞碎片和桿菌
細胞碎片只會隨著細胞狀態的變差而變多，通常增長不快；桿菌則增殖非?？?，以常見的大腸桿菌為例，常溫25℃增殖1倍需要40min左右（此數據可查閱相關文獻驗證），培養基很快變黃且渾濁。

2.凋亡細胞和球菌
凋亡細胞通常只比正常細胞小一點，只會隨著細胞狀態的變差而變多，通常增長不快；球菌則要小很多，且成串或成團，培養基很快變黃且渾濁。
3.雜質纖維和霉菌
雜質纖維通常是過濾時殘留的濾紙纖維，或者是酒精棉球上的棉纖維，在不開瓶處理的情況下其數量不會增長；霉菌的話雖然增殖速度沒有桿菌和球菌快，但還是會有明顯增殖。