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細胞的復蘇方法
發布時間: 2016-12-12
1.復溫從液氮中取出凍存管,立即放入37~40℃水浴中,快速搖晃直至完全融化,應在1分鐘內完成復溫過程。
2.去除凍存液無菌打開凍存管,將細胞凍存液移入無菌的離心管內,加入約5 ml生長液,輕輕搖勻,將細胞懸液經1000r/min離心5分鐘,棄上清液。
3.復蘇培養離心后細胞沉淀用少量生長液懸浮,轉入培養瓶中補齊培養液,即配成所需要的細胞濃度,置37℃,5% CO2孵箱培養?;驘o菌操作打開凍存管,將細胞懸液吸到培養瓶中補足生長液后,置37℃ 5% C02孵箱中培養,4~6小時后,待細胞貼壁后輕輕倒掉含凍存液的生長液,換生長液后繼續培養。